网刊加载中。。。

使用Chrome浏览器效果最佳，继续浏览，你可能不会看到最佳的展示效果，

确定继续浏览么?

复制成功，请在其他浏览器进行阅读

双酶水解-DNS比色法测定白卡纸中淀粉含量的研究

  • 刘文婷 1
  • 张胜华 1
  • 李陈巧 1
  • 孙鹏 2
  • 王鹏 3 ✉
  • 安俊健 3
1. 湖北中烟工业有限责任公司，湖北武汉，430040； 2. 武汉红金龙印务股份有限公司，湖北武汉，430100； 3. 湖北工业大学绿色轻工材料湖北省重点实验室，湖北武汉，430068

中图分类号： TS762.2

最近更新：2025-03-24

DOI：10.11980/j.issn.0254-508X.2025.03.016

  • 全文
  • 图表
  • 参考文献
  • 作者
  • 出版信息
EN 引
目录contents

摘要

为测定白卡纸中的淀粉含量，本研究选用α-淀粉酶和糖化酶对白卡纸进行双酶协同降解，采用3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法对酶解产物葡萄糖进行测定，进而计算白卡纸中的淀粉含量。在单因素实验分析研究的基础上，采用响应面分析法优化双酶水解-DNS比色法测定淀粉含量的最佳条件，建立数学模型，回归方程失拟误差不显著（P<0.000 1），理论值与测定值吻合（R2为0.988 6）；双酶水解-DNS比色法测定淀粉含量的最佳条件为：双酶添加量5 mg/mL，酶解时间75 min，酶解温度40 ℃。对该方法进行精密度和加标回收率测试，相对标准偏差为0.8%，加标回收率为96.2%~98.0%。

白卡纸具有定量高、坚挺厚实等特点，广泛应用于印刷和包装行业，卷烟行业中白卡纸每年需求量达50~60万t[

1]。作为一种高档包装材料，白卡纸应具有良好的印刷适应性和上机适应性。为了使白卡纸的挺度、平滑度、光泽度、白度、层间结合强度等指标满足使用要求，在白卡纸的生产中需使用较多的原淀粉和改性淀粉[2]。原淀粉主要用于层间喷淋，增加纤维间的结合强度，使纸张厚度均匀，同时提高纸张的抗张强度、挺度、耐破度、层间结合强度；改性淀粉作为增强剂和助留助滤剂，广泛应用于造纸湿部，用于提高纸张的强度，改善纸张表面性能；原淀粉和改性淀粉还被广泛用作表面施胶剂，提高纸张强度，改善纸张的印刷适应性[3-4]。由此可知，淀粉在改善和提高白卡纸的性能方面发挥重要作用。对于造纸企业来说，了解淀粉在纸张中的留着率，可以调节生产工艺，控制产品质量；对于纸张研究而言，了解纸张中的淀粉含量，有利于研究淀粉对不同纸张性能的影响，从而开发新产品。因此，一种准确测定白卡纸中淀粉含量的方法亟需被建立。

目前，我国还没有纸张中淀粉含量测定的相关标准。美国TAPPI T 419 om—2010提供了纸张中淀粉含量的测定方法，但该方法只适合纸张中原淀粉及仅通过常规氧化技术或酶转化改性的淀粉定量测定，不适合阳离子淀粉、取代淀粉、接枝淀粉或与树脂结合的淀粉等含量的测定。国内研究者依据淀粉遇碘会生成蓝色络合物的原理，建立了一种利用分光光度计测定纸张中淀粉含量的方法[

5-7]，但由于影响淀粉-碘络合物最大吸收波长的因素较多（如温度、碘-碘化钾浓度、淀粉聚合度等[8]），该方法的可靠性受到一定限制。

淀粉是天然存在的重要碳水化合物，广泛存在于各种植物中；同时，淀粉在食品中有着广泛的应用。研究者对植物和食品中淀粉含量的测定提出了多种方法[

9]，其中经典的方法是淀粉经酶解或酸水解产生葡萄糖，通过滴定法、分光光度法和色谱法等方法测定葡萄糖含量，并由葡萄糖含量推算出淀粉含量[10-12]。对于白卡纸，酸水解可能会降解纤维素和半纤维素，产生葡萄糖，从而导致测定结果偏高。酶解法包括糖化酶直接水解淀粉的方法[13]、α-淀粉酶和糖化酶的双酶法[14]、α-淀粉酶和盐酸的酶酸法[15]。由于α-淀粉酶和糖化酶均具有专一性，在酶解淀粉的过程中，对纸张中纤维素和半纤维素不起作用，因此，α-淀粉酶和糖化酶的双酶体系适合纸张中淀粉的水解[16]。3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法具有简便、快捷、灵敏度高等特点，是目前还原糖实验室检测中最常用的方法[17]。针对白卡纸中淀粉难以分离、含量高、淀粉种类复杂的特点，本研究采用α-淀粉酶和糖化酶对白卡纸中淀粉进行酶解，生成葡萄糖，利用DNS法定量测定葡萄糖含量，再由葡萄糖含量计算出淀粉含量。该研究方法操作简单、测试结果准确可靠，可为白卡纸中淀粉含量测定方法标准的制定提供新思路和新方法。

1 实验

1.1　实验材料和仪器

1.1.1　实验材料

白卡纸，湖北中烟技术中心；3,5-二硝基水杨酸（DNS）显色液，飞净生物科技有限公司；阳离子淀粉，江西六和化工实业有限公司；糖化酶（酶活性130 000 U/g），湖南鸿鹰祥生物工程股份有限公司；α-淀粉酶（酶活性4 000 U/g），北京双旋微生物培养基制品厂；葡萄糖、冰醋酸、醋酸钠、碘、碘化钾，均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司；水为实验室自制超纯水。

1.1.2　实验仪器

V-1100D可见分光光度计，上海美谱达仪器有限公司；SHZ-82B水浴恒温振荡器，常州市国旺仪器制造有限公司。

1.2　实验方法

1.2.1　水分的测定

纸张中水分按照GB/T 462—2008《纸、纸板和纸浆 分析试样水分的测定》进行测定。

1.2.2　葡萄糖标准溶液的配制

准确称取在105 ℃的温度下干燥至质量恒定的葡萄糖0.5 g，加入少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至1 000 mL，葡萄糖标准溶液的质量浓度为0.5 g/L。

1.2.3　淀粉溶液的配制

准确称取5.000 0 g淀粉于500 mL烧杯中，倒入少量蒸馏水搅拌均匀，加入到正在沸腾的蒸馏水中，用蒸馏水对烧杯进行少量多次洗涤，洗涤水也加入烧杯中，继续加热沸腾5 min，冷却至室温后，用蒸馏水定容至500 mL，淀粉溶液的质量浓度为10 g/L。

1.2.4　白卡纸中淀粉的酶解及酶解液中葡萄糖含量的测定

称取0.5 g样品，加入100 mL pH值为4.8的醋酸-醋酸钠缓冲溶液浸泡12 h，在分散器上分散，用100 mL缓冲溶液分多次洗涤后，倒入500 mL的具塞三角烧瓶中，置于水浴恒温振荡器保温30 min后，加入糖化酶与α-淀粉酶的混合液，使溶液的总体积为300 mL。反应结束后用移液管吸取0.5 mL酶解液，加入0.5 mL DNS显色液，于沸水浴中加热5 min，取出后用流动水迅速冷却，加入4.0 mL蒸馏水，摇匀，用过滤头过滤后在540 nm波长处测定光吸收值。

1.2.5　单因素实验设计

在糖化酶与α-淀粉酶双酶水解白卡纸淀粉的过程中，影响淀粉水解的因素主要有双酶质量比、双酶添加量、酶解时间、酶解温度等。本研究选择双酶质量比、双酶添加量、酶解温度、酶解时间4个因素分别进行单因素实验。通过多次预实验，对各单因素条件的酶解条件进行设定，具体见表1，实验操作按1.2.4进行。

表1  单因素实验设计
Table 1  Single factor experimental design
单因素条件固定酶解条件
双酶质量比（8∶1、6∶1、2∶1、2∶3、1∶3） 双酶添加量5 mg/mL，酶解温度60 ℃，酶解时间120 min，溶液体积300 mL
双酶添加量（3、4、5、6、7 mg/mL） 双酶质量比2∶1，酶解温度60 ℃，酶解时间120 min，溶液体积300 mL
酶解时间（10、30、60、90、120 min） 双酶质量比2∶1，双酶添加量5 mg/mL，酶解温度60 ℃，溶液体积300 mL
酶解温度（30、40、50、60、70 ℃） 双酶质量比2∶1，双酶添加量5 mg/mL ，酶解时间60 min，溶液体积300 mL

1.2.6　淀粉含量的计算

白卡纸中淀粉含量由式(1)计算。

X=V0.5·m·0.9M·1 000×100% （1）

式中，X为纸张样品中淀粉含量，%；V为酶解反应溶液的总体积，mL；0.5为DNS比色法测定所取待测液的体积，mL；m为样品的平均吸光度值代入标准曲线方程计算得出的葡萄糖含量，mg；0.9为葡萄糖与淀粉之间的换算系数；M为纸张样品质量，g。

2 结果与讨论

2.1　葡萄糖标准曲线及方法检出限

取6支10 mL比色管并编号，按表2顺序加入各种试剂，混合均匀后置于沸水浴中加热5 min进行显色处理，取出后用流动水迅速冷却，向各比色管中加入去离子水4.0 mL，摇匀，在540 nm波长下，用0#管调零，分别读取各管的吸光度值（A540）。以A540值为横坐标，葡萄糖含量（m）为纵坐标，采用线性拟合绘制标准曲线，标准曲线方程见式(2)，R2=0.999。

m=0.410 6A540 + 0.002 （2）
表2  葡萄糖标准曲线的绘制
Table 2  Standard curve protracting of glucose
试管编号0.5 g/L葡萄糖标准液/mL蒸馏水/mLDNS试剂/mL葡萄糖含量/mgA540
0 0 0.5 0.5 0 0
1 0.1 0.4 0.5 0.05 0.11
2 0.2 0.3 0.5 0.10 0.241
3 0.3 0.2 0.5 0.15 0.355
4 0.4 0.1 0.5 0.2 0.493
5 0.5 0 0.5 0.25 0.599

采用扣除空白样吸光度后，A540=0.01所对应的浓度值为检出限，此时300 mL反应液对应的葡萄糖质量浓度约为12.2 mg/L，换算为淀粉浓度约11.0 mg/L，因此纸张样品中淀粉含量的检出限为0.66%。

2.2　白卡纸中淀粉含量测定单因素实验分析

2.2.1　双酶质量比对白卡纸中淀粉水解的影响

图1为双酶质量比对白卡纸中淀粉水解的影响。由图1可知，当α-淀粉酶和糖化酶的质量比为2∶1时，酶解液中葡萄糖质量浓度最高，淀粉水解的最彻底。与此同时，反应溶液与I2-KI溶液显色为试剂本身的颜色，表明白卡纸中的淀粉已水解完全。因此，α-淀粉酶和糖化酶的最佳质量比选为2∶1。

图1  双酶质量比对白卡纸中淀粉水解的影响

Fig. 1  Effect of double enzyme mass ratio on starch enzymatic hydrolysis in white cardboard

2.2.2　双酶添加量对白卡纸中淀粉水解的影响

图2为双酶添加量对白卡纸中淀粉水解的影响。由图2可知，随着双酶添加量的增加，白卡纸淀粉水解液中的葡萄糖质量浓度也升高，这一阶段影响淀粉水解的因素主要是双酶添加量。当双酶添加量达5 mg/mL时，白卡纸淀粉水解液中的葡萄糖质量浓度最高；之后再增加双酶添加量，淀粉水解液中的葡萄糖质量浓度基本不变。这是因为此时影响淀粉水解的主要因素是底物的含量，双酶添加量已达到饱和，没有多余的底物与酶反应。

图2  双酶添加量对白卡纸中淀粉水解的影响

Fig. 2  Effect of double enzyme addition amount on starch enzymatic hydrolysis in white cardboard

2.2.3　酶解时间对白卡纸中淀粉水解的影响

图3为酶解时间对白卡纸中淀粉水解的影响。由图3可知，酶解时间对淀粉水解的影响显著。随着酶解时间的增加，酶解液中葡萄糖质量浓度逐渐升高，但当酶解时间达到60 min时，酶解液中葡萄糖质量浓度趋于稳定，说明酶与淀粉已经充分反应。

图3  酶解时间对白卡纸中淀粉水解的影响

Fig. 3  Effect of enzymatic hydrolysis time on starch enzymatic hydrolysis in white cardboard

2.2.4　酶解温度对白卡纸中淀粉水解的影响

图4为酶解温度对白卡纸中淀粉水解的影响。由图4可知，酶解温度对淀粉水解的影响不显著。具体来说，尽管酶解温度从30 ℃逐渐升高到70 ℃，但葡萄质量浓度量的变化幅度相对较小，表明酶解温度变化并未显著影响淀粉水解的效率。

图4  酶解温度对白卡纸中淀粉水解的影响

Fig. 4  Effect of enzymatic hydrolysis temperature on starch enzymatic hydrolysis in white cardboard

2.3　响应面实验

2.3.1　实验设计方案与结果

根据单因素探索实验结果，以双酶添加量（X1）、酶解时间（X2）、酶解温度（X3）3个参数为自变量，葡萄糖质量浓度为响应值，设计了三因素三水平17个实验点的响应面实验，水平设计见表3，分析结果见表4。

表3  响应面分析因素及水平
Table 3  Analytical factors and levels for response surface methodology
水平X1/（mg·mL-1）X2/minX3/℃
-1 3 30 40
0 4 60 50
1 5 90 60
表4  白卡纸中淀粉含量测定Box-Behnken实验设计与结果
Table 4  Box-Behnken experimental design and results of starch content determination for white cardboard
序号X1X2X3葡萄糖质量浓度/（mg·mL-1）
1 -1 -1 0 0.072
2 1 -1 0 0.111
3 -1 1 0 0.144
4 1 1 0 0.214
5 -1 0 -1 0.112
6 1 0 -1 0.219
7 -1 0 1 0.138
8 1 0 1 0.185
9 0 -1 -1 0.101
10 0 1 -1 0.179
11 0 -1 1 0.093
12 0 1 1 0.190
13 0 0 0 0.138
14 0 0 0 0.137
15 0 0 0 0.136
16 0 0 0 0.138
17 0 0 0 0.139

2.3.2　回归方程的建立及方差分析

对表4数据进行回归分析，获得葡萄糖质量浓度对双酶添加量、酶解时间和酶解温度的二次多项回归方程见式(3)。

Y=-0.013 2+0.006 7X1+0.056 4X2+0.000 1X3+0.001 5X1X2+0.000 9X1X3+0.000 4X2X3+0.000 6X12+0.018 8X22+0.000 7X32 （3）

对该回归方程及系数进行显著性检验，结果见表5。由表5可知，R2为0.988 6，失拟误差不显著（P<0.000 1），说明该模型显著，拟合程度良好。一次项X1、X2对响应值的影响极为显著，X3对响应值的影响不显著，也即双酶添加量和酶解时间对淀粉水解的影响显著，酶解温度影响较小；二次项X22的P值<0.01，说明响应值的变化相对复杂，3个实验因子对淀粉水解的影响不是简单的线性关系，曲面效应显著；交互项X1X2、X1X3的P值为<0.05，说明双酶添加量与酶解时间和酶解温度交互作用差异显著，X2X3的P>0.05，说明酶解时间和酶解温度交互作用不明显。

表5  白卡纸中淀粉水解方差分析
Table 5  Analysis of variance of starch hydrolysis in white cardboard
方差来源平方和自由度均方F值P值显著性
模型 0.085 6 9 0.009 5 67.35 < 0.000 1 **
X1 0.006 7 1 0.006 7 47.64 0.000 2 **
X2 0.056 4 1 0.056 4 399.73 < 0.000 1 **
X3 0.000 1 1 0.000 1 0.796 7 0.401 7
X1X2 0.001 5 1 0.001 5 10.77 0.013 5 *
X1X3 0.000 9 1 0.000 9 6.37 0.039 5 *
X2X3 0.000 4 1 0.000 4 2.56 0.153 9
X12 0.000 6 1 0.000 6 4.47 0.072 2
X22 0.018 8 1 0.018 8 132.85 < 0.000 1 **
X32 0.000 7 1 0.000 7 5.23 0.056 0
残差 0.001 0 7 0.000 1
失拟误差 0.001 0 3 0.000 3
纯误差 0 4 0
总离差 0.086 6 16

注   **表示高度显著（P<0.01）；*表示差异显著（P<0.05）。

2.3.3　响应面的分析

图5~图7为根据回归分析结果做出的响应面图和等值线图。由图5~图7可知，双酶添加量和酶解时间对白卡纸中淀粉水解葡萄糖质量浓度影响明显，酶解温度影响不明显；X1与X2，X1与X3，也即双酶添加量与酶解时间，双酶添加量与酶解温度的交互作用显著[

17-18]，与上述分析结果一致。

图5  酶解时间与双酶添加量对葡萄糖质量浓度的响应面和等值线

Fig. 5  Response surface plots and contour plots of the glucose mass concertration under the interaction of enzymatic hydrolysis time and double enzyme addition amount

图6  酶解温度与双酶添加量对葡萄糖质量浓度的响应面和等值线

Fig. 6  Response surface plots and contour plots of the glucose mass concertration under the interaction of enzymatic temperature and double enzyme addition amount

图7  酶解温度与酶解时间对葡萄糖质量浓度的响应面和等值线

Fig. 7  Response surface plots and contour plots of the glucose mass concertration under the interaction of enzymatic temperature and time

2.3.4　最佳反应条件及验证实验

由Design-Expert V 13.0.5软件分析得出最佳条件：双酶添加量4.995 mg/mL，酶解时间74.7 min，酶解温度40.1 ℃，该条件下葡萄糖的理论质量浓度为0.219 mg/mL。考虑实际操作，将条件修正为双酶添加量5 mg/mL，酶解时间75 min，酶解温度40 ℃。在此条件下，通过6次平行实验，测得最佳条件下白卡纸中淀粉水解葡萄糖质量浓度为0.220 mg/mL，测得白卡纸中淀粉含量为13.1%，相对标准偏差（RSD）为0.8%。

2.4　加标回收率

称取实验纸张样品，在反应溶液中加入与纸张样品中淀粉含量相近和加倍量的淀粉溶液进行反应，测定加标回收率，结果见表6。由表6可知，纸张样品加标回收率为96.2%~98.0%。

表6  纸张样品加标回收率
Table 6  Standard recovery of paper samples
绝干质量/g淀粉质量分数/%淀粉添加量/mL加标回收率/%
0.502 2 13.1 5 98.0
0.504 1 13.1 10 97.8
0.498 6 13.1 20 96.2

注  　淀粉溶液质量浓度为10 g/L。

3 结论

采用淀粉酶与糖化酶双酶对白卡纸中的淀粉进行水解，使其生成葡萄糖，利用3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法定量测定葡萄糖含量，再由葡萄糖含量计算出纸张中淀粉含量。双酶水解-DNS比色法测定淀粉含量的最佳条件为双酶添加量5 mg/mL，酶解时间75 min，酶解温度40 ℃。该方法相对标准偏差为0.8%，加标回收率为96.2%~98.0%，具有操作简单、重复性好、回收率高、测试结果准确可靠等特点，可用于白卡纸中淀粉含量的测定，也为纸和纸板中淀粉含量的测定提供新思路、新方法。

参考文献

1

朱红艳， 贾伟萍， 孙 鹏， 等. 烟用印刷白卡纸“返黄”机制的研究［J］. 包装工程， 2022， 43（9）： 39-45. [百度学术] 

ZHU H Y， JIA W P， SUN P， et al. Brightness Reversion Mechanism of White Cardboard for Tobacco Printing［J］. Packaging Engineering， 2022， 43（9）： 39-45. [百度学术] 

2

赵德清， 杨汝男， 平清伟. 烟包用涂布白卡纸国内发展概况［J］. 上海造纸， 2007， 38（1）： 33-38. [百度学术] 

ZHAO D Q， YANG R N， PING Q W. Survey to Coated Card Board Used as Cigarette Packing［J］. Shanghai Paper Industry， 2007， 38（1）： 33-38. [百度学术] 

3

唐少敏.阳离子直链淀粉和支链淀粉的吸附行为差异及其对纸张增强效果的影响［D］.南京：南京林业大学， 2023. [百度学术] 

TANG S M. Differences in adsorption behavior of cationic amylose and amylopectin and their effects on paper enhancement［D］.Nanjing： Nanjing Forestry University， 2023. [百度学术] 

4

尹沾合， 江剑芳.淀粉在涂布白卡纸中的应用研究［J］.中国造纸， 2009， 28（7）：46-48. [百度学术] 

YIN Z H，JIANG J F.Application of Starch in Coated Ivory Board ［J］.China Pulp ＆ Paper ，2009， 28（7）：46-48. [百度学术] 

5

王春林， 宋荣钊， 沈伟民， 等. 纸上淀粉含量的快速测定法［J］.广州化学， 1988（3）：53-56. [百度学术] 

WANG C L ， SONG R Z， SHEN W M， et al. Rapid Determination Method for Starch Content in Paper［J］. Guangzhou Chemical， 1988（3）：53-56. [百度学术] 

6

徐嵘， 谢堂堂， 陈桂强， 等.分光光度法测定纸品中淀粉含量［J］.中国造纸， 2012， 31（2）：19-22. [百度学术] 

XU R， XIE T T， CHEN G Q， et al. Quantitative Determination of Starch in Paper by Spectrophotometer［J］. China Pulp＆Paper， 2012， 31（2）：19-22. [百度学术] 

7

郭欣， 侯鑫， 李党国.分光光度法测试卷烟用纸中淀粉的含量［J］.中华纸业， 2019， 40（16）：34-37. [百度学术] 

GUO X， HOU X， LI D G. Determination of Starch Content in Cigarette Paper Through Spectrophotometry［J］. China Pulp & Paper Industry， 2019， 40（16）：34-37. [百度学术] 

8

张茹.采用热解技术直接检测纸张中阳离子淀粉含量［J］.国际造纸， 2015， 34（1）：55-61. [百度学术] 

ZHANG R. Direct Determination of Cationic Starches in Paper Samples Using Analytical Pyrolysis［J］.World Pulp and Paper， 2015， 34（1）：55-61. [百度学术] 

9

李兵， 肖香兰， 杨永红，等. 国内外淀粉含量的检测标准现状及检测方法研究进展［J］. 食品安全质量检测学报， 2021， 12（9）：3830-3839. [百度学术] 

LI B， XIAO X L， YANG Y H， et al. Current Situation of Standard Methods and Research Progress of Starch Content Determination at China and Abroad［J］. Journal of Food Safety and Quality， 2021， 12（9）：3830-3839. [百度学术] 

10

李长滨， 崔丽伟， 庄军辉. 火腿肠中影响淀粉测定干扰项方法研究［J］. 现代牧业， 2019， 3（3）： 50-51. [百度学术] 

LI C B， CUI L W， ZHUANG J H. A method to determine interferences in measuring starch in ham sausage ［J］. Modern Animal Husbandry， 2019， 3（3）： 50-51. [百度学术] 

11

郭有辉， 胡露， 王丽娜， 等. 3，5-二硝基水杨酸比色法测定风味鱿鱼中淀粉及蔗糖的含量［J］. 食品安全质量检测学报， 2018， 9（18）：4983-4987. [百度学术] 

GUO Y H， HU L， WANG L N， et al. Determination of starch and sucrose in flavor squid by 3,5-dinitrosalicylic acid colorimetric method ［J］. Journal of Food Safety and Quality， 2018， 9（18）： 4983-4987. [百度学术] 

12

蔡志兴. 肉松制品淀粉含量测定中干扰物质的研究［J］. 福建分析测试， 2013， 22（6）： 49-52. [百度学术] 

CAI Z X. Study of the Interfering Substances in the Dried Meat Floss Starch Content Determination［J］. Fujian Analysis Testing， 2013， 22（6）： 49-52. [百度学术] 

13

方勇， 赵胜军， 张丹丹， 等. 饲料纤维水平对其淀粉含量测定方法准确性的影响［J］. 粮食与饲料工业， 2015（8）： 66-68. [百度学术] 

FANG Y， ZHAO S J， ZHANG D D， et al. Effect of Cellulose Level on the Accuracy of the Determination Method of Starch Content in Feed［J］. Cereal & Feed Industry， 2015（8）： 66-68. [百度学术] 

14

何孟杭. 双酶水解-高效液相色谱法测定肉松中淀粉含量的研究［J］. 福建分析测试， 2013， 22（5）： 59-62. [百度学术] 

HE M H. Determination of Starch in Dried Meat Floss by Double Enzymolysis-HPLC Method［J］. Fujian Analysis Testing， 2013， 22（5）： 59-62. [百度学术] 

15

李彦莹， 朱新焰， 石亚娜， 等. 酶水解法测定滇黄精淀粉含量的工艺优化［J］. 西南农业学报， 2018， 31（12）： 2533-2536. [百度学术] 

LI Y Y， ZHU X Y， SHI Y N， et al. Optimization Technologies of Enzymatic Hydrolysis for Determination of Starch in Polygonatum Kingianum［J］. Southwest China Journal of Agricultural Sciences， 2018， 31（12）： 2533-2536. [百度学术] 

16

徐靖雯， 郑明珠， 刘景圣， 等.复合酶法改性淀粉的研究进展［J］.食品研究与开发， 2024， 45（1）：187-192. [百度学术] 

XU J W， ZHENG M Z， LIU J S， et al. Research Progress of Starch Modified by Compound Enzymes［J］. Food Research and Development， 2024， 45（1）：187-192. [百度学术] 

17

朱凯杰， 陆国权， 张迟. 响应面法优化水杨酸比色测定还原糖的研究［J］. 中国粮油学报， 2013， 28（8）： 107-113. [百度学术] 

ZHU K J， LU G Q， ZHANG C. Optimization of Salicylic Acid Colorimetric Determination of Reducing Sugar by Response Surface Methodology［J］. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association， 2013， 28（8）： 107-113. [百度学术] 

18

李志霞， 聂继云， 闫 震， 等.响应面法对 3，5-二硝基水杨酸比色法测定水果中还原糖含量条件的优化［J］.分析测试学报， 2016， 35（10）：1283-1288. [百度学术] 

LI Z X， NIE J Y， YAN Z， et al.Optimization of 3,5-dinitrosalicylic Acid Colorimetry Determination Conditions of Reducing Sugar in Fruits by Response Surface Method［J］. Journal of Instrumental Analysis， 2016， 35（10）：1283-1288. [百度学术]